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021-54845833/15800441009
产品及特点：
马铃薯 Y 病毒病又称烟草脉带病、烟草脉斑病毒病。由于病毒株系不同而表现出不同症状。主要有脉带花叶型、脉斑型和褪绿斑点型。脉带型在烟株上部叶片呈黄绿花叶斑驳，脉间色浅，叶脉两侧深绿，形成明显的脉带，严重时出现卷叶或灼斑，叶片成熟不正常，色泽不均，品质下降，烟株矮化。脉斑型下部叶片发�。镀坪郑鞑嗦龃右痘汲驶液诨蚝旌稚邓溃侗啵驴杉苁浜郑ジ焉舷趾旌只蚝谏邓捞跷�。褪绿斑点型初期与脉带型相似，但上部叶片现褪绿斑点，后中下部叶产生褐色或白色小坏死斑，病斑不规则，严重时整叶斑点密集，形成穿孔或脱落。马铃薯 Y 病毒�。貉讨攴⒉〕跗诔鱿置髀觯痪眯纬苫ㄒ缎偷陌卟担婧笮∫堵黾溲丈涞堵隽讲嗟淖橹噬盥躺础Ｊ芑邓乐晗登秩镜牟≈辏堵龀屎稚梁谏邓�。本产品是根据 PCR 原理开发的马铃薯病毒 Y 型检测的试剂盒。
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据马铃薯病毒Y型的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
规格及成分：
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编号 |
成分 |
规格 |
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试剂一 |
5×双酶一管式 RT-PCR Buffer |
200 μL（橘黄盖） |
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试剂二 |
MMLV-Taq Mix |
75 μL（红盖） |
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试剂三 |
超纯水 |
1 mL（亮黄盖） |
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试剂四 |
马铃薯病毒Y型 RT-PCR 引物混合液 |
100 μL（白盖） |
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试剂五 |
马铃薯病毒Y型 RT-PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） |
50 μL（黄盖） |
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试剂六 |
使用手册 |
1 份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
自备试剂：
样品 RNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提�。喑龅囊桓鍪� PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 马铃薯病毒Y型 PCR阳性对照的 1000 倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品 RNA。
2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。可以选购本公司的柱式病毒 RNAout。
二、设置RT- PCR 反应(20μL 体系)：
3. 如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管(额外增加的两个管一个是RT-PCR 阳性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照)并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：
|
成份 |
N+2 个 样品管 |
RT-PCR 阴性对照 |
RT-PCR 阳性对照 |
|
5×双酶一管式RT-PCR Buffer |
各 4 μL |
4 μL |
4 μL |
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马铃薯病毒Y型 RT-PCR 引物混合液 |
各 2 μL |
2μL |
2μL |
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N+2 个制备的 RNA 样品 |
各 12.5μL |
-- |
-- |
|
超纯水 |
-- |
12.5μL |
-- |
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马铃薯病毒Y型 RT-PCR 阳性对照的 1000倍稀释液 |
-- |
-- |
12.5μL |
|
MMLV-Taq Mix |
1.5 μL |
1.5 μL |
1.5 μL |
|
过程 |
温度 |
时间 |
|
逆转录 |
42℃ |
30 min |
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预变性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反应35个循环 |
95℃ |
30 sec |
|
58℃ |
30 sec |
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72℃ |
20 sec |
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最后延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照必须有预期条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
四、特别提示：
本公司的所有产品，仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
