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产品及特点：
牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)会引起牛传染性鼻气管炎病毒，又称“坏死性鼻炎”、“红鼻病”，是一种�：粑澜哟バ源静�。临床表现形式多样，以呼吸道为主，伴有结膜炎、流产、乳腺炎，有时诱发小牛脑炎等。毒常常经上呼吸道粘膜、生殖道粘膜侵入，还可经眼结膜上皮和软壳蜱侵入，是否经口腔感染仍未证实。经上呼吸道入侵的病毒沿粘膜、神经纤维、淋巴管扩散到邻近部位引起上呼吸道炎症、结膜炎，对养殖业造成较大经济损失，因此牛传染性鼻气管炎病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增牛传染性鼻气管炎病毒，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：
|
编号 |
成分 |
规格 |
|
试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1 mL（红盖） |
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试剂二 |
超纯水 |
1 mL（亮黄色） |
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试剂三 |
牛传染性鼻气管炎病毒 PCR 引物混合液 |
100 μL（白盖） |
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试剂四 |
牛传染性鼻气管炎病毒 PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） |
50 μL（黄盖） |
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试剂五 |
使用手册 |
1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 RNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 牛传染性鼻气管炎病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
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成份 |
N+2 个样品管 |
PCR 阴性对照 |
PCR阳性对照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
|
牛传染性鼻气管炎病毒PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
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N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
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PCR 阴性对照（水） |
-- |
18μL |
-- |
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PCR 阳性对照（牛传染性鼻气管炎病毒PCR阳性对照1000倍稀释液） |
-- |
-- |
18μL |
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过程 |
温度 |
时间 |
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预变性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反应35个循环 |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
四、特别提示：
本公司的所有产品，仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
