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021-54845833/15800441009
乙型肝炎病毒前基因组RNA简称HBV pgRNA (Hepatitis B Virus pregenomic RNA，pgRNA)，它是肝细胞内HBV cccDNA转录得到的RNA。研究显示，对治疗中的慢性乙型肝炎患者，当病毒的逆转录和DNA合成被抑制后，其血清中的HBV RNA水平能反映肝细胞内cccDNA的存在及其转录活性，而且还证实了慢性乙型肝炎患者血清中存在的HBV RNA为3.5kb大小的前基因组RNA，这些pgRNA是以HBV RNA病毒样颗粒形式存在于成熟病毒颗粒的核衣壳内，并和持续的病毒感染及病毒学反弹风险相关，因此快速灵敏诊断乙型肝炎病毒前基因组RNA具有重要意义。本产品以探针法荧光定量RT-PCR技术为基础开发的专门检测乙型肝炎病毒前基因组RNA的试剂盒，它具有下列特点：
规格及成分
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成分 |
规格 |
包装 |
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探针法qRT-PCR缓冲液 |
500μL |
0.5mL蓝盖管 |
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探针法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL红盖管 |
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荧光PCR专用模板稀释液 |
1mL |
1.5mL绿盖管 |
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乙型肝炎病毒前基因组RNA qRT-PCR引物-探针干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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乙型肝炎病毒前基因组RNA RT-PCR阳性对照 (1×10E7拷贝/μL) |
50μL |
0.5mL黄盖管 |
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使用手册 |
1份 |
无 |
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本产品采用五孔盒包装 |
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注 意：引物-探针干粉在使用前需要短暂离心，然后在离心管中加入162μL的超纯水充分混匀后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀释标准曲线样品以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45μL荧光RT-PCR专用模板稀释液，用带芯枪头，下同）。
3. 在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
自备试剂
样品RNA
运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期1年
