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021-54845833/15800441009
细胞基本信息
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名 称 |
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货 号 |
TW-CC3480
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品 牌 |
通蔚生物 |
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细胞规格 |
100μl |
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储 存 |
-20℃ |
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菌株抗性 |
无抗 |
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培养基 |
YPDA |
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菌株类别 |
酵母菌 |
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培养条件 |
28℃，有氧，YPDA |
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基因型 |
MATahisΔ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4 |
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质粒转化 |
电转 |
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保存方式 |
30%甘油，-20℃ |
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基本应用 |
酵母双杂交 |
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菌株简介 |
DUALmembrane系统是DUALsystems BioTech公司开发的专门筛选跨膜蛋白间相互作用的检测技术，它利用分离的泛素系统（split-ubiquitin）直接检测天然状态下膜蛋白间的相互作用，是目前市面上唯一检测膜蛋白间相互作用的酵母双杂系统。此系统采用NMY51酵母菌株，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；此菌株Transformation marker为: trp1, leu2-3，报告基因为：HIS3, ADE2 和 lacZ，第一步通过营养缺陷型报告基因（HIS3, ADE2）进行选择性生长筛�。徊酵ü� LacZ 报告基因进行β-半乳糖分析显色的定量或半定量筛�。龆懒⒌谋ǜ婊颍懿煌舳拥牡骺兀档图傺粜约嘎�。原理：泛素（ubiquitin）分子量很�。� 76aa 残基组成；泛素作为降解信号分子，可以连接另外一种蛋白质的 N 端，然后被泛素专一性蛋白酶（UBPs）识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。泛素可以人为分成两部分：N 端（Nub），C 端（Cub）。首先，人为地将泛素 Nub 的 3 位异亮氨酸突变为甘氨酸（NubI 突变为 NubG）。这样与 Cub 的亲合力大大降低，避免了 Cub 和 Nub 自我结合或接近的可能性。其次，将Cub 部分与人工合成的 LexA-VP16 转录激活因子融合成一个融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常条件下 NubG不与Cub 结合，UBPs 也不能识别分离的泛素，转录激活因子也不会被切下来。最后，将要检测的蛋白质分别与NubG和Cub融合，形成 bait 融合蛋（bait-cub-LexA -VP16）和 prey 融合蛋白（prey-NubG）。如果 bait 和 prey发生相互作用，就会促使 NubG 和 Cub 的相互接近，被 UBPs 识别，导致 LexA-VP16 的解离，进入核内，从而激活报告基因的转录。 此系统可使用四种Bait质粒：pBT3-N，pBT3-SUC，pBT3-STE，pBT3-C，筛选标志均为LEU；三种Prey质粒：pPR3-C ，pPR3-SUC，pPR3-STE，筛选标志均为TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的条件下培养，然后使用30%的甘油保藏菌种。 |
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供应范围 |
仅供限于科研实验研究 |
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运输方式 |
低温快递运输 |
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菌株优势 |
通蔚生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
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特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与通蔚生物联系 |
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售后服务 |
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细胞予重发 |
1.细胞运输中遭遇的各种问题，细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等，重发。 |
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2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发。 |
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3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发。 |
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4.常温发货的细胞静置2小时后，干冰冻存发货的细胞复苏2天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发。 |
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5.常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后，重发。 |
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6.细胞活性问题，请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发。 |
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细胞不予重发 |
1.客户操作造成细胞污染，不重发。 |
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2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发。 |
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3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发。 |
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4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片，不重发。 |
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5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发。 |
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6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发。 |
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特别说明 |
上海通蔚生物客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打免费服务电话021-54845833/15800441009，我们随时给予实验中的免费解答。 |
