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土壤脂肪酶(Solid-Lipase，S-LPS)活性试剂盒测定原理
注 意 ：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于
各种生物中。
测定原理：
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪、甲
苯 80mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
标准品：液体 10 μL×1 瓶，10 ?mol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 mL 甲苯，充分溶解。
样本处理：
建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，4℃，4000g 离
心 10min，取上清待测。
S-LPS 测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min。
3. 在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂
37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 200μL 上层液加入微量石英比色皿/96 孔板，于 710nm 处测定吸光值。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
S-LPS 活性计算公式：
活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反总÷（W×V 样
÷V 样总）÷T=16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷W
C 标准品：10 ?mol/mL；V 反总：反应总体积，0.8mL；V 样：反应中加入样本体积，0.05mL；V 样总：
加入提取液体积，1mL； W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。
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