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胞培养中会出现哪些污染?细胞培养常见的污染及原因

发布时间:2025-02-18     发布作者:上海金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物

  细胞污染会对细胞后继培养造成一定问题,了解细胞常见细胞污染问题,针对当前问题快速判断是至关重要!为了让大家区分细胞污染,金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting针对细胞常见污染类型进行盘点。了解这些常见细胞污染类型,会后续培养细胞预防污染打下基础。


  细胞培养中会出现哪些污染?


  细菌污染


  细菌污染形态大小在0.5~5μm,形状呈现球状或杆状,形状规则,分布不均匀;一般细胞污染后48-72小时增值爆发式增值;营养被消耗掉,细胞培养基变黄,呈浑浊,通过镜 下观察,有明显的定向运动。

细菌污染


  处理方法:对于细胞轻度污染可用10X双抗清洗处理,如果细胞较为真贵,可以尝试离心收集细胞,用新鲜培养基重悬,并通过0.22μm的滤器过滤除菌,对于重度细胞污染建议消杀后弃掉。


  真菌污染


  酵母菌和霉菌是两种常见真菌的形态。霉菌污染通常呈现为絮状、绒毛状或蛛网状,而酵母菌污染则更像是分散的小颗粒或成团的菌落;常见肉眼可见的菌落,真菌污染会导致培养基颜色发生各种变化,包括变黄、变绿、变黑、变紫等等;随着时间的推移,真菌会逐渐扩散并污染整个培养体系。真菌会产生孢子,孢子具有很强的抗逆性和传播性,容易污染其他细胞。


真菌污染

真菌污染


  处理办法:真菌污染较难根除,不建议保留,建议消杀后丢弃;由于真菌污染难以清除,预防更为重要。


  支原体污染


  支原体是目前已知最小的原核生物,在光学显微镜下难以观察,需要借助电子显微镜或特殊染色方法;感染支原体的细胞,在某一时间点碎片突然增多,还包括细胞生长变慢、形态改变(如细胞变圆、出现空泡)、培养基pH值变化不明显等;气溶胶传播是支原体污染的主要途径之一,操作过程中的交叉污染也比较常见,支原体污染会对细胞的生长、代谢和功能产生广泛的影响,严重干扰实验结果!

支原体污染

支原体污染


  鉴定方法:PCR法、显色法、荧光染色法、培养法


  处理办法:若细胞状态尚可,添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴;若细胞状态很差,建议消杀后丢弃。预防胜于治疗。严格的无菌操作、定期检测、使用支原体清除试剂预防性处理等措施都非常重要。


  黑胶虫污染


  黑胶虫无明确定义,在镜下无法直接观察到。主要表现为细胞状态差、黑点多或碎片多,布朗运动。通过检测发现主要为支原体污染,部分为未知增值不明显支原体污染。


  处理办法:通过各种检测方法排除已知的污染,例如支原体、细菌和真菌。 如果确定是支原体污染,则应使用针对性的支原体清除试剂。如果排除了所有已知污染,仍然存在黑胶虫现象,则可以尝试使用一些广谱的抗生素或抗真菌药物,但效果难以保证;若细胞状态很差,建议消杀后丢弃。


  严格的无菌操作、定期清洁和消毒、使用高质量的培养基和血清等,都是减少黑胶虫污染的关键


  上述为大家介绍细胞常见的污染及原因。通过了解上述细胞污染及处理方法,确保细胞培养实验结果的可靠性。为了避免细胞污染,平时在细胞培养同时,预防最关键。


  



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