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    【金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物】:猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒使用方法

    发布时间:2022-11-30     发布作者:上海金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物

    猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒使用方法操作步骤
    编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
    加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
    温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
    配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    温育:操作同3。
    洗涤:操作同5。
    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


    计算和结果判定:

    试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10

    临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
    阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为旋毛虫(Trichinella)阴性
    阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为旋毛虫(Trichinella)阳性

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