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品质保证 · 金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting试剂
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发布时间：2024-02-23 发布作者：金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物
什么是elisa试剂盒？elisa是最经典的一种免疫学实验操作实验，中文名字叫酶联免疫吸附测定实验。酶联免疫吸附实验（elisa）是一种用来定量检测样本中的某种抗原方法。因此，因此在许多研究和检测领域中使用 ELISA 来检测和定量各种样本类型中的抗原，如使用 ELISA 分析细胞裂解物、血样、食品等特定物质。常见检测领域包括如生物学、医学、农学等。
酶联免疫吸附实验（elisa）是一种高敏度的定量实验，通常用于测量生物样品中分析物的浓度，如细胞因子和抗体。这种方法的一般原理包括三个步骤：
首先是将目标分析物捕获或固定在微孔板上，然后用目标特异性检测蛋白检测分析物，最后就是酶反应，既共轭酶将底物转化为有色产物。根据不同的捕获方法和检测方法，elisa可以分为四种方法。
ELISA有四种主要的方法：直接法、间接法、夹心法和竞争法。每种类型的描述如下，并用图说明了分析物和抗体是如何结合和使用的。
1.直接法（酶标抗体结合抗原）
待测抗原粘附在微孔板的孔内，然后使用带酶标的一抗与抗原结合，最后加入底物进行显色，并检测吸光度。由于吸光度的大小与抗原体复合物的数量成一定的线性关系。因此，也就间接的实现了测定抗原数量的目标。
2.间接法（一抗结合抗原，酶标二抗结合一抗）
和直接法的区别在于两种抗体代替一种抗体，结合抗原的抗体（一抗）不带酶标记物，当抗原和抗体结合后，再使用带酶标的二抗结合一抗，加入底物显色并检测。
3.夹心法（捕获抗体和一抗结合抗原，酶标二抗结合一抗）
在间接法基础上又再发展出更为复杂的夹心法，它在微孔底部预先包被一种捕获抗体，用于结合抗原，在这个复合物的基础上再结合一抗、二抗并检测。
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直接法 |
间接法、夹心法 |
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优点 |
操作简单 不存在抗原和二抗发生交叉反应导致的结构错误 |
二抗选择面广泛，制备也比较简单，大大降低成本；酶标种类也有更多选择 一抗无需考虑标记酶标信息，所以它在制备过程可以尽可能的保证免疫结合活性，检测灵敏度大大提高，因为信号得到放大。 |
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缺点 |
检测抗体制备比较困难且成本比较高，因为既要保证免疫活性还要标记酶信息，检测信号无法放大，信号越弱 |
潜在的二抗与目标抗原发生反应，造成信号错乱风险，更多操作步骤，反应时间更长。 |
4.竞争法（酶标抗原和抗原竞争结合抗体）
无法同时结合捕获抗体和一抗的话，就不适合用夹心检测。此时可以在微孔板孔内包被抗体，同时提供带标记的同种抗原，把待检测抗原和标记抗原一起加入和抗体结合，由于两者会竞争结合抗体，所以最终检测的信号越高，证明代测抗原越少，反之则越多。
感兴趣的物质越多，发生的反应就越多，与固体表面结合的连接酶就越少。这些反应通常通过溶液颜色的变化来指示。
