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品质保证 · 通蔚试剂
021-54845833/15800441009品质保证 · 通蔚试剂
发布时间：2024-09-12 发布作者：上海通蔚生物
ELISA试剂盒在国内有很多叫法，例如ELISA检测试剂盒、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等...那么，elisa试剂盒是用来干什么的呢？ELISA试剂盒是一种常用的实验室免疫分析技术，用于检测各种生物分子，如抗体、抗原、蛋白质和细胞因子。ELISA试剂盒其高灵敏、可操作性高等优势广泛应用于科研、医疗、食品及环境检测等领域。下面上海通蔚生物详细为大家介绍下酶联免疫试剂盒原理、用途、种类、使用方法及购买指南。带您全面了解ELISA试剂盒。
图1 通蔚生物elisa试剂
ELISA是一种利用特异性抗体（或抗原）捕获样品中的目标抗原（或抗体），并利用酶与其底物的反应检测/定量目标分子的方法。该方法原理是将抗原或抗体吸附到固相载体表面，然后加入酶标记的二抗，形成酶标抗原-抗体复合物。当底物溶液加入到反应体系中时，底物在酶的催化下发生化学反应，产生颜色变化。通过检测颜色变化，可以确定是否存在待检测的抗原或抗体。根据其原理，该检测又分为直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA、竞争性ELISA等。
图2 为底物在酶的催化下发生化学反应，产生颜色变化
Elisa试剂盒用于检测各种生物分子，如抗体、抗原、蛋白质和细胞因子。其主要应用如下：
1.抗体检测：ELISA试剂盒可用于检测体液中的特定抗体，如病毒抗体、抗细胞自身抗体等，对于疾病的诊断、感染的筛查以及免疫学研究非常重要。
2.抗原检测：试剂盒也可用于检测样品中的特定抗原，如病原体抗原、肿瘤标志物等，这在疾病的早期诊断、药物治疗监测以及流行病学调查中具有重要意义。
3.蛋白质检测：试剂盒可用于定量检测样品中特定蛋白质的浓度，如细胞因子、酶类、激素等，对于生物学研究、临床诊断和药物研发等都具有重要的应用价值。
4. 细胞因子检测：试剂盒还可用于检测样品中的细胞因子，如白细胞介素、干扰素等，这对于炎症反应的评估、免疫调节研究以及免疫治疗监测具有重要意义。
除此之外，ELISA试剂盒还可以提供定量测定目标物质的浓度，通过与标准曲线的比较，可以获得准确的目标物质浓度数据。这一特性使得其在药物开发和药物筛选、环境监测、食品安全检测、病毒学研究和植物学研究等领域都有广泛的应用。
ELISA试剂盒种类繁多，根据检测目标分为，ELISA试剂盒的常见的种类：
1、细胞因子检测试剂盒：
如白介素、选择素、集落刺激因子，肿瘤坏死因子，干扰素，转化生长因子，趋化因子，细胞因子受体，粘附分子，生长因子，凋亡因子等等。
2、肝纤维化检测elisa试剂盒：
如纤维连接蛋白，透明质酸，胶原，基质金属蛋白酶抑制因子，基质金属蛋白酶，层粘蛋白等。
3、心肌检测elisa试剂盒：
如肌钙蛋白，肌红蛋白，C-反应蛋白等等。
4、内分泌检测elisa试剂盒
如甲状腺,胰腺,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇，雌三醇，5-羟色胺，17-羟孕酮等。
5、自身免疫检测elisa试剂盒：
如甲状腺,盐水可提取核抗原抗体(ENA),抗核抗体,DNA,抗心磷脂抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱疮,蛋白酶,抗组蛋白抗体,粒细胞弹性蛋白酶,皮肤抗体,肾上腺抗体,肾小球基底膜,肾小球基底膜抗体,髓过氧化物酶,条纹肌抗体,网硬蛋白抗体,胃壁细胞抗体,胃蛋白酶,系统性红斑狼疮,细菌性渗透性增强因子等。
6、标志物检测elisa试剂盒：
如肿瘤标志物，组织多肽抗原，肿瘤相关因子，胰腺癌，直肠癌，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经异性稀醇化酶，上皮膜抗原，人抗小鼠抗体，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，大肠癌，肺癌，大小便隐血检测，癌胚抗原，β-2。
图3 通蔚白介素试剂盒
elisa试剂盒操作步骤：
试剂准备
1.使用前将所有试剂平衡至室温。
2.洗液：如果浓缩液中已经形成结晶，平衡至室温，并轻轻地摇晃直到结晶*溶解。加入去离子水或蒸馏水稀释20ml浓缩洗涤液至500ml。
3.底物溶液：显色试剂A和B应该在使用前15min以等体积混合。避光保存。每孔需要200ul生成的混合物。
4.IL-6标准品：使用5ml标准稀释液RD5T(适用于细胞培养上清液样本)或标准稀释液RD6F(适用于血清/血浆样本)重新配制IL-6标准品。重新配制的产品为300pg/ml贮存液。稀释前允许将标准品至少轻轻搅拌15min。
5.吸取适当的标准稀释液667ul到pg/mlEP管，500ul稀释液到其它EP管中。适用贮存液配制一系列的稀释液(如下)。进行下一次转移前充分地混匀各个EP管。没有稀释的标准品作为高标准。适当的标准稀释液作为0标准(0pg/ml)。
注意：使用时戴眼睛、手、脸和衣服的防护。
elisa试剂盒的注意事项：
1.elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.elisa试剂盒请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
elisa试剂盒选择对实验结果准确性是至关重要的，在选购elisa试剂盒选择可以从以下几个方面来选择：
1.选择灵敏度合适的试剂盒：灵敏度是检测目标分子的最低浓度的能力。如果您需要检测低浓度的目标分子，那么选择高灵敏度的试剂盒是必要的。
2.选择特异性好的试剂盒：特异性是指试剂盒只对特定目标分子产生反应的能力。选择特异性好的试剂盒可以避免假阳性结果。
3.选择有良好重复性的试剂盒：重复性是指相同样本在不同时间或不同实验室条件下得到相同结果的能力。选择有良好重复性的试剂盒可以确保实验结果的可靠性。
4、选择技术支持和服务商家：优质品牌的试剂盒制造商通常提供全面的技术支持和服务，包括使用指导、售后服务等。这些支持可以帮助您更好地进行实验操作，提高实验效率。
上海通蔚生物一直致力于研发生产高质量的科研试剂，对每一批产品实行严格的质控，严格控制批间差和批内差，为生命科学提供全面的免疫检测相关产品！