在科研实验，ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等。今天由上海金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物来介绍一下样本细胞。
细胞样本根据目的物所在部位可选择
细胞裂解液或
细胞培养上清作为样本。
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如果目的物所是分泌型，存在于细胞之外的话，即可选择细胞培养上清作为样本。
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胞培养上清处理方法：取细胞培养上清，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
目的物是存在于细胞内，则建议选择细胞裂解液作为样本。细胞裂解液处理方法如下：
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贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）；
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将收集到的细胞用冷PBS洗3次；
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物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）：
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超声破碎：取适量PBS重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂；
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反复冻融：将待破碎的细胞在-20℃以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎；
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将标本于2-8度1500×g离心10分钟，收集上清备用。
细胞裂解液处理过程中，物理方法更优异于化学方法，化学方法会引入酸或碱，可能会对ELISA实验产生影响。利用化学的细胞裂解液裂解细胞，如果去污剂成分会干扰抗原抗体反应影响检测效果，推荐利用透析和超滤的方法除去去污剂成分。
样本保存事项：
在处理样本过程就是收集目标蛋白，由于这些目标蛋白容易变性，降解，该过程要尽量的温和。赝本处理之后存储也非常重要，不要反复冻融，处理后的样本尽量密封保存，保存温度在4°保存要小于一周，-20°保存要小于1个月，-80°保存要小于2个月。
上述是上海金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting为大家介绍ELISA实验常见样本细胞处理方法，希望对大家有所帮助！上海金年会·(jinnianhui)金字招牌诚信至上-Gold Annual Meeting生物有ELISA试剂盒，灵敏度高，易用受广大科研者青睐，欢迎选购。
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